Sandwich Elisa VD3 Bộ xét nghiệm RUO Vitamin D3 Elisa Kit để sử dụng nghiên cứu

Human Vitamin D3; Bộ ELISA VD3

• Ngày hết hạn: sáu tháng.
• Lưu trữ: 2-8 ℃.
• Bộ dụng cụ ELISA Human Vitamin D3 (VD3) của chúng tôi là để kiểm tra nồng độ Vitamin D3 (VD3) trong huyết thanh người, huyết tương, môi trường nuôi cấy hoặc bất kỳ dịch sinh học nào.

Nguyên tắc

  Bộ ELISA này sử dụng Sandwich-ELISA làm phương pháp.Microelisa stripplate được cung cấp trong bộ dụng cụ này đã được phủ sẵn một loại kháng thể đặc hiệu với Vitamin D3 (VD3).Các chất chuẩn hoặc mẫu được thêm vào các giếng Microelisa stripplate thích hợp và kết hợp với kháng thể cụ thể.Sau đó, một kháng thể liên hợp Horseradish Peroxidase (HRP) - đặc hiệu cho Vitamin D3 (VD3) được thêm vào mỗi dải Microelisa và ủ.Các thành phần tự do bị rửa trôi.Dung dịch chất nền TMB được thêm vào mỗi giếng.Chỉ những giếng có chứa Vitamin D3 (VD3) và kháng thể liên hợp Vitamin D3 (VD3) HRP mới có màu xanh lam và sau đó chuyển sang màu vàng sau khi thêm dung dịch dừng.Mật độ quang học (OD) được đo bằng phương pháp quang phổ ở bước sóng 450 nm.Giá trị OD tỷ lệ với nồng độ Vitamin D3 (VD3).Bạn có thể tính nồng độ Vitamin D3 (VD3) trong các mẫu bằng cách so sánh OD của các mẫu với đường chuẩn.

Vật liệu được cung cấp kèm theo bộ

• Pha loãng các chất chuẩn

Mười giếng được thiết lập cho các tiêu chuẩn trong dải Microelisa.Trong Giếng 1 và Giếng 2, dung dịch chuẩn 100μl và dung dịch đệm pha loãng tiêu chuẩn 50μl được thêm vào và trộn đều.Trong Giếng 3 và Giếng 4, dung dịch 100μl từ Giếng 1 và Giếng 2 được thêm vào tương ứng.Sau đó, 50μl dung dịch đệm pha loãng chuẩn được thêm vào và trộn đều.Dung dịch 50μl được loại bỏ từ Giếng 3 và Giếng 4. Trong Giếng 5 và Giếng 6, dung dịch 50μl từ Giếng 3 và Giếng 4 được thêm vào tương ứng.Sau đó, 50μl dung dịch đệm pha loãng chuẩn được thêm vào và trộn đều.Trong Giếng 7 và Giếng 8, dung dịch 50μl từ Giếng 5 và Giếng 6 được thêm vào tương ứng.Sau đó, 50μl dung dịch đệm pha loãng chuẩn được thêm vào và trộn đều.Trong Giếng 9 và Giếng 10, dung dịch 50μl từ Giếng 7 và Giếng 8 được thêm vào tương ứng.Sau đó, 50μl dung dịch đệm pha loãng chuẩn được thêm vào và trộn đều.Dung dịch 50μl được loại bỏ từ Giếng 9 và Giếng 10. Sau khi pha loãng, tổng thể tích trong tất cả các giếng là 50μl và các nồng độ là 30 ng / ml, 20 ng / ml, 10 ng / ml, 5 ng / ml và 2,5 ng / ml, tương ứng.

Tính toán kết quả

Nồng độ đã biết của Tiêu chuẩn Vitamin D3 trong người (VD3) và OD đọc tương ứng của nó được vẽ trên thang log (trục x) và thang log (trục y) tương ứng.Nồng độ Vitamin D3 trong người (VD3) trong mẫu được xác định bằng cách vẽ đồ thị OD của mẫu trên trục Y.Nồng độ ban đầu được tính bằng cách nhân hệ số pha loãng.

Độ chính xác

Độ chính xác trong khảo nghiệm (Độ chính xác trong một cuộc khảo nghiệm): 3 mẫu có Vitamin D3 ở mức độ thấp, trung bình và cao cho người (VD3) được kiểm tra lần lượt 20 lần trên một đĩa.

Inter-assay Precision (Độ chính xác giữa các lần xét nghiệm): 3 mẫu với Human Vitamin D3 ở mức độ thấp, trung bình và cao (VD3) được thử nghiệm trên 3 đĩa khác nhau, 8 lần lặp lại trong mỗi đĩa.

CV (%) = SD / meanX100

Thử nghiệm nội bộ: CV <10%

Thử nghiệm giữa các kỳ: CV <12%

Phạm vi khảo nghiệm

0,8 ng / ml -36 ng / ml

Nhạy cảm:

0,3 ng / ml

• Bảo quản bộ dụng cụ ở 4 ° C sau khi nhận. Bộ dụng cụ phải được cân bằng với nhiệt độ phòng trước khi xét nghiệm.Lấy bất kỳ dải nào không cần thiết ra khỏi đĩa tráng kháng thể Human Vitamin D3 (VD3), đậy lại trong giấy bạc có khóa zip và giữ ở 4 ° C.
• Đường cong chuẩn phải được bao gồm trong mọi thử nghiệm.Nhân rộng các giếng được khuyến khích.Nếu giá trị OD của mẫu lớn hơn giếng đầu tiên của chất chuẩn, vui lòng pha loãng mẫu (n lần) trước khi thử nghiệm.Khi tính toán nồng độ Vitamin D3 (VD3) ban đầu, vui lòng nhân hệ số pha loãng tổng (XnX5).